aidsВИЧ-инфекция и иммуносупрессииHIV Infection and Immunosuppressive Disorders2077-9828Baltic Medical Education Center10.22328/2077-9828-2024-16-3-82-93aids-939Research ArticleЭПИДЕМИОЛОГИЯEPIDEMIOLOGYВариабельность белка Rev ВИЧ-1 суб-субтипа А6 у пациентов с различными стадиями ВИЧ-инфекцииVariability of Rev protein in HIV-1 sub-subtype A6 in patients with different stages of HIV infectionhttps://orcid.org/0000-0001-5299-3081КузнецоваА. И.KuznetsovaA. I.

Кузнецова Анна Игоревна — кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник, заведующая лабораторией вирусов лейкозов

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

a-myznikova@list.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4150-2280КимК. В.KimK. V.

Ким Кристина Вячеславовна — младший научный сотрудник лаборатории вирусов лейкозов

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

kimsya99@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-9180-9846АнтоноваА. А.AntonovaA. A.

Антонова Анастасия Александровна — кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории вирусов лейкозов

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

anastaseika95@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6787-9345ЛебедевА. В.LebedevA. V.

Лебедев Алексей Владимирович — кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории вирусов лейкозов

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

lebedevalesha236@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-3110-0843ОжмеговаЕ. Н.OzhmegovaE. N.

Ожмегова Екатерина Никитична — кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории вирусов лейкозов

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

belokopytova.01@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6221-5678ТумановА. С.TumanovA. S.

Туманов Александр Сергеевич — научный сотрудник лаборатории вирусов лейкозов

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

desep@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4792-8928МунчакЯ. М.MunchakYa. M.

Мунчак Яна Михайловна — младший научный сотрудник лаборатории вирусов лейкозов

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

yana_munchak@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2495-6501Орлова-МорозоваЕ. А.Orlova-MorozovaE. A.

Орлова-Морозова Елена Александровна — кандидат медицинских наук, заведующая амбулаторно-поликлиническим отделением

129110,Москва, ул. Щепкина, д. 61/2, к. 8

Moscow

https://orcid.org/0000-0001-9268-4929ПронинА. Ю.ProninA. Yu.

Пронин Александр Юрьевич — кандидат медицинских наук, главный врач

129110, Москва, ул. Щепкина, д. 61/2, к. 8

Moscow

https://orcid.org/0000-0001-8755-1419ПрилиповА. Г.PrilipovA. G.

Прилипов Алексей Геннадьевич — доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник, заведующий лабораторией молекулярной генетики

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

a_prilipov@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7912-4270КазенноваЕ. В.KazennovaE. V.

Казеннова Елена Валерьевна — доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории вирусов лейкозов

123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 18

Moscow

kazennova@rambler.ruНациональный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н. Ф. ГамалеиРоссияN. F. Gamaleya National Research Center for Epidemiology and MicrobiologyRussian FederationЦентр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниямиРоссияCenter for the Prevention and Control of AIDS and Infectious DiseasesRussian Federation2024281120241638293Copyright © Кузнецова А.И., Ким К.В., Антонова А.А., Лебедев А.В., Ожмегова Е.Н., Туманов А.С., Мунчак Я.М., Орлова-Морозова Е.А., Пронин А.Ю., Прилипов А.Г., Казеннова Е.В., 20242024Кузнецова А.И., Ким К.В., Антонова А.А., Лебедев А.В., Ожмегова Е.Н., Туманов А.С., Мунчак Я.М., Орлова-Морозова Е.А., Пронин А.Ю., Прилипов А.Г., Казеннова Е.В.Kuznetsova A.I., Kim K.V., Antonova A.A., Lebedev A.V., Ozhmegova E.N., Tumanov A.S., Munchak Y.M., Orlova-Morozova E.A., Pronin A.Y., Prilipov A.G., Kazennova E.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://hiv.bmoc-spb.ru/jour/article/view/939Цель

Цель. Сравнение генетического разнообразия белка Rev ВИЧ-1 суб-субтипа А6 у людей, живущих с ВИЧ (ЛЖВ), c разными стадиями заболевания.

Материалы и методы

Материалы и методы. Анализировались клинические образцы цельной крови, полученные от 227 ЛЖВ, ранее не получавших лечения, которые наблюдались в ГКУЗ Московской области «Центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями». Проводили экстракцию провирусной ДНК, амплификацию области первого и второго экзона гена rev с последующим секвенированием продуктов амплификации. Генотипирование полученных последовательностей выполняли путем анализа второго экзона гена rev. Затем проводили сравнение консервативности и аминокислотных замен в последовательностях белка Rev у пациентов из различных групп.

Результаты и их обсуждение. 220 из 227 (96,9%) образцов содержали ВИЧ-1 суб-субтипа А6. У пациентов с IV стадией консервативность в белке Rev была меньше. Обнаружены две замены (L13I, S113P), которые встречались со статистически значимой разницей у ЛЖВ с разными стадиями ВИЧ-инфекции.

Заключение

Заключение. Полученные результаты подтверждают гипотезу о корреляции между аминокислотной последовательностью белка Rev и течением ВИЧ-инфекции и обозначают необходимость дальнейших исследований этого вопроса.

The aim of the study

The aim of the study. The comparison of genetic diversity of Rev protein in HIV-1 sub-subtype A6 in people living with HIV (PLHIV) with different stages of the disease.

Materials and methods

Materials and methods. 227 whole blood clinical samples received from PLHIV who have not had previously treatment and observed in Moscow Regional Center for the Prevention and Control of AIDS and Infectious Diseases were analyzed. The extraction of proviral DNA, the amplification of the first and the second rev exons with the followed sequencing was carried out. Subtyping was conducted by analyzing the rev second exon. Then the conservatism and amino acid substitutions in Rev sequences were compared in patients from different groups.

Results and discussion

Results and discussion. 220/227 (96.9%) samples contained HIV-1 sub-subtype A6. In patients with IV stage of the disease the conservation in Rev was significantly lower. There were found two substitutions (L13I, S113P) with a statistically significant difference in occurrence in PLHIV with different stages of HIV infection.

Conclusion

Conclusion. The results obtained confirm the hypothesis of correlation between Rev structure and course of HIV infection and indicate the necessity for further research on this field.

белок RevВИЧ-1суб-субтип А6Rev proteinHIV-1sub-subtype A6Исследование выполнено за счет средств гранта Российского научного фонда № 23-15-00027, https://rscf.ru/project/23-15-00027/ReferencesOgarkova D., Antonova A., Kuznetsova A., Adgamov R., Pochtovyi A., Kleimenov D., Tsyganova E., Gushchin V., Gintsburg A., Mazus A. CurrentOgarkova D., Antonova A., Kuznetsova A., Adgamov R., Pochtovyi A., Kleimenov D., Tsyganova E., Gushchin V., Gintsburg A., Mazus A. Current Trends of HIV Infection in the Russian Federation // Viruses. 2023. Vol. 15. Р. 2156. https://doi.org/10.3390/v15112156.Trends of HIV Infection in the Russian Federation // Viruses. 2023. Vol. 15. Р. 2156. https://doi.org/10.3390/v15112156.Antiretroviral Therapy Cohort Collaboration. Survival of HIV-positive patients starting antiretroviral therapy between 1996 and 2013: a collaborative analysis of cohort studies // Lancet HIV. 2017. Vol. 4 (8). e349–56. https://doi.org/10.1016/s2352-3018(17)30066-8.Antiretroviral Therapy Cohort Collaboration. Survival of HIV-positive patients starting antiretroviral therapy between 1996 and 2013: a collaborative analysis of cohort studies // Lancet HIV. 2017. Vol. 4 (8). e349–56. https://doi.org/10.1016/s2352-3018(17)30066-8.Toljić B., Milašin J., De Luka S.R., Dragović G., Jevtović D., Maslać A., Ristić-Djurović J.L., Trbovich A.M. HIV-Infected Patients as a Model of Aging // Microbiol Spectr. 2023. Vol. 11 (3). e0053223. doi: 10.1128/spectrum.00532-23.Toljić B., Milašin J., De Luka S.R., Dragović G., Jevtović D., Maslać A., Ristić-Djurović J.L., Trbovich A.M. HIV-Infected Patients as a Model of Aging // Microbiol Spectr. 2023. Vol. 11 (3). e0053223. doi: 10.1128/spectrum.00532-23.Nanditha N.G.A., Paiero A., Tafessu H.M., St-Jean M., McLinden T., Justice A.C., Kopec J., Montaner J.S.G., Hogg R.S., Lima V.D. Excess burden of age-associated comorbidities among people living with HIV in British Columbia, Canada: a population-based cohort study // BMJ Open. 2021. Vol. 11 (1). e041734. doi: 10.1136/bmjopen-2020-041734.Nanditha N.G.A., Paiero A., Tafessu H.M., St-Jean M., McLinden T., Justice A.C., Kopec J., Montaner J.S.G., Hogg R.S., Lima V.D. Excess burden of age-associated comorbidities among people living with HIV in British Columbia, Canada: a population-based cohort study // BMJ Open. 2021. Vol. 11 (1). e041734. doi: 10.1136/bmjopen-2020-041734.Sarma P., Cassidy R., Corlett S., Katusiime B. Ageing with HIV: Medicine Optimisation Challenges and Support Needs for Older People Living with HIV: A Systematic Review // Drugs Aging. 2023. Vol. 40 (3). Р. 179–240. doi: 10.1007/s40266-022-01003-3.Sarma P., Cassidy R., Corlett S., Katusiime B. Ageing with HIV: Medicine Optimisation Challenges and Support Needs for Older People Living with HIV: A Systematic Review // Drugs Aging. 2023. Vol. 40 (3). Р. 179–240. doi: 10.1007/s40266-022-01003-3.Webel A.R., Schexnayder J., Cioe P.A., Zuñiga J.A. A. Review of Chronic Comorbidities in Adults Living With HIV: State of the Science // J.Assoc Nurses AIDS Care. 2021. Vol. 32 (3). Р. 322–346. doi: 10.1097/JNC.0000000000000240.Webel A.R., Schexnayder J., Cioe P.A., Zuñiga J.A. A. Review of Chronic Comorbidities in Adults Living With HIV: State of the Science // J.Assoc Nurses AIDS Care. 2021. Vol. 32 (3). Р. 322–346. doi: 10.1097/JNC.0000000000000240.Elsheikh M.M., Tang Y., Li D., Jiang G. Deep latency: A new insight into a functional HIV cure // EBioMedicine. 2019. Vol. 45. Р. 624–629. doi: 10.1016/j.ebiom.2019.06.020.Elsheikh M.M., Tang Y., Li D., Jiang G. Deep latency: A new insight into a functional HIV cure // EBioMedicine. 2019. Vol. 45. Р. 624–629. doi: 10.1016/j.ebiom.2019.06.020.http://dx.doi.org/10.22328/2077-9828-2023-15-3-26-37 Kuznetsova A.I. The role of HIV-1 polymorphism in the pathogenesis of the disease. HIV Infection and Immunosuppressive Disorders, 2023, Vol. 15 (3), рр. 26–37 (In Russ.).Кузнецова А.И. Роль полиморфизма ВИЧ-1 в патогенезе // ВИЧ-инфекция и иммуносупрессии. 2023. Т. 15 (3). С. 26–37. doi:http://dx.doi.org/10.22328/2077-9828-2023-15-3-26-37Kuznetsova A., Kim K., Tumanov A., Munchak I., Antonova A., Lebedev A., Ozhmegova E., Orlova-Morozova E., Drobyshevskaya E., Pronin A., Prilipov A. and Kazennova E. Features of Tat Protein in HIV-1 Sub-Subtype A6 Variants Circulating in the Moscow Region, Russia // Viruses. 2023. Vol. 15. Р. 2212. https://doi.org/10.3390/v15112212.Kuznetsova A., Kim K., Tumanov A., Munchak I., Antonova A., Lebedev A., Ozhmegova E., Orlova-Morozova E., Drobyshevskaya E., Pronin A., Prilipov A. and Kazennova E. Features of Tat Protein in HIV-1 Sub-Subtype A6 Variants Circulating in the Moscow Region, Russia // Viruses. 2023. Vol. 15. Р. 2212. https://doi.org/10.3390/v15112212.Truman CT.S., Järvelin A., Davis I., Castello A. HIV Rev-isited // Open Biol. 2020. Vol. 10. Р. 200320. https://doi.org/10.1098/rsob.200320. 11. Jayaraman B, Fernandes J.D., Yang S., Smith C., Frankel A.D. Highly Mutable Linker Regions Regulate HIV-1 Rev Function and Stability // Sci Rep. 2019. Vol. 9. Р. 5139. https://doi.org/10.1038/s41598-019-41582-7.Truman CT.S., Järvelin A., Davis I., Castello A. HIV Rev-isited // Open Biol. 2020. Vol. 10. Р. 200320. https://doi.org/10.1098/rsob.200320.Jackson P.E., Tebit D.M., Rekosh D., Hammarskjold M.L. Rev-RRE Functional Activity Differs Substantially Among Primary HIV-1 Isolates // AIDS Res Hum Retroviruses. 2016. Vol. 32 (9). Р. 923–934. doi: 10.1089/AID.2016.0047.Jayaraman B, Fernandes J.D., Yang S., Smith C., Frankel A.D. Highly Mutable Linker Regions Regulate HIV-1 Rev Function and Stability // Sci Rep. 2019. Vol. 9. Р. 5139. https://doi.org/10.1038/s41598-019-41582-7.Kirichenko A., Kireev D., Lapovok I., Shlykova A., Lopatukhin A., Pokrovskaya A., Bobkova, M., Antonova A., Kuznetsova A., Ozhmegova E., Shtrek S., Sannikov A., Zaytseva N., Peksheva O., Piterskiy M., Semenov A., Turbina G., Filoniuk N., Shemshura A., Kulagin V., Kolpakov D., Suladze A., Kotova V., Balakhontseva L., Pokrovsky V., Akimkin V. HIV-1 Drug Resistance among Treatment-Naïve Patients in Russia: Analysis of the National Database, 2006–2022 // Viruses. 2023. Vol. 15. Р. 991. https://doi.org/10.3390/v15040991.Jackson P.E., Tebit D.M., Rekosh D., Hammarskjold M.L. Rev-RRE Functional Activity Differs Substantially Among Primary HIV-1 Isolates // AIDS Res Hum Retroviruses. 2016. Vol. 32 (9). Р. 923–934. doi: 10.1089/AID.2016.0047.Antonova A., Kazennova E., Lebedev A., Ozhmegova E., Kuznetsova A., Tumanov A., Bobkova M. Recombinant Forms of HIV-1 in the Last Decade of the Epidemic in the Russian Federation // Viruses. 2023. Vol. 15. Р. 2312. https://doi.org/10.3390/v15122312.Kirichenko A., Kireev D., Lapovok I., Shlykova A., Lopatukhin A., Pokrovskaya A., Bobkova, M., Antonova A., Kuznetsova A., Ozhmegova E., Shtrek S., Sannikov A., Zaytseva N., Peksheva O., Piterskiy M., Semenov A., Turbina G., Filoniuk N., Shemshura A., Kulagin V., Kolpakov D., Suladze A., Kotova V., Balakhontseva L., Pokrovsky V., Akimkin V. HIV-1 Drug Resistance among Treatment-Naïve Patients in Russia: Analysis of the National Database, 2006–2022 // Viruses. 2023. Vol. 15. Р. 991. https://doi.org/10.3390/v15040991.Kazennova E.V., Lapovok I.A., Laga V.Y., Vasiliev A.V., Bobkova M.R. Natural polymorphisms of the HIV pol variant gene 1 IDU A. HIV Infection and Immunosuppression. 2012, Vol. 4 (4), рр. 44–51 (In Russ.).Antonova A., Kazennova E., Lebedev A., Ozhmegova E., Kuznetsova A., Tumanov A., Bobkova M. Recombinant Forms of HIV-1 in the Last Decade of the Epidemic in the Russian Federation // Viruses. 2023. Vol. 15. Р. 2312. https://doi.org/10.3390/v15122312.Kirichenko A., Lapovok I., Baryshev P., van de Vijver D.A.M.C., van Kampen J.J.A., Boucher C.A.B., Paraskevis D, Kireev D. Genetic features of HIV-1 integrase sub-subtype A6 predominant in Russia and predicted susceptibility to INSTIs // Viruses. 2020. Vol. 12 (8). Р. 838. https://doi.org/10.3390/v12080838.Казеннова Е.В., Лаповок И.А., Лага В.Ю., Васильев А.В., Бобкова М.Р. Естественные полиморфизмы гена pol варианта ВИЧ 1 IDU A // ВИЧ-инфекция ииммуносупрессии. 2012. Т. 4 (4). С. 44–51.https://cr.minzdrav.gov.ru/recomend/79_1.Kirichenko A., Lapovok I., Baryshev P., van de Vijver D.A.M.C., van Kampen J.J.A., Boucher C.A.B., Paraskevis D, Kireev D. Genetic features of HIV-1 integrase sub-subtype A6 predominant in Russia and predicted susceptibility to INSTIs // Viruses. 2020. Vol. 12 (8). Р. 838. https://doi.org/10.3390/v12080838.Miller S.A., Dykes D.D., Polesky H.F. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells // Nucleic. Acids. Res. 1988. Vol. 16 (3). Р. 1215. https://doi.org/10.1093/nar/16.3.1.Министерство здравоохранения Российской Федерации. Клинические рекомендации. ВИЧ-инфекция у взрослых; 2020. Доступно: https://cr.minzdrav.gov.ru/recomend/79_1.Nguyen L.T., Schmidt H.A., von Haeseler A., Minh B.Q. IQ-TREE: a fast and effective stochastic algorithm for estimating maximum-likelihood phylogenies // Mol. Biol. Evol. 2015. Vol. 32 (1). Р. 268–274. doi: 10.1093/molbev/msu300.Miller S.A., Dykes D.D., Polesky H.F. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells // Nucleic. Acids. Res. 1988. Vol. 16 (3). Р. 1215. https://doi.org/10.1093/nar/16.3.1.HIV Databases. 2022. URL: https://www.hiv.lanl.gov (дата обращения: 16.01.2024).Nguyen L.T., Schmidt H.A., von Haeseler A., Minh B.Q. IQ-TREE: a fast and effective stochastic algorithm for estimating maximum-likelihood phylogenies // Mol. Biol. Evol. 2015. Vol. 32 (1). Р. 268–274. doi: 10.1093/molbev/msu300.Darriba D., Taboada G.L., Doallo R., Posada D. jModelTest 2: more models, new heuristics and parallel computing // Nat. Methods. 2012. Vol. 9 (8). Р. 772. doi: 10.1038/nmeth.2109HIV Databases. 2022. URL: https://www.hiv.lanl.gov (дата обращения: 16.01.2024).Letunic I., Bork P. Interactive Tree Of Life (iTOL) v5: an online tool for phylogenetic tree display and annotation // Nucleic Acids Res. 2021. Vol.49 (W1): W293–W296. doi: 10.1093/nar/gkab301.Darriba D., Taboada G.L., Doallo R., Posada D. jModelTest 2: more models, new heuristics and parallel computing // Nat. Methods. 2012. Vol. 9 (8). Р. 772. doi: 10.1038/nmeth.2109Lebedev A., Kim K., Ozhmegova E., Antonova A., Kazennova E., Tumanov A., Kuznetsova A. Rev Protein Diversity in HIV-1 Group M Clades // Viruses. 2024. Vol. 16. Р. 759. https://doi.org/10.3390/v16050759.Letunic I., Bork P. Interactive Tree Of Life (iTOL) v5: an online tool for phylogenetic tree display and annotation // Nucleic Acids Res. 2021. Vol.49 (W1): W293–W296. doi: 10.1093/nar/gkab301.Rossenkhan R., Novitsky V., Sebunya T.K., Musonda R., Gashe B.A. et al. Viral Diversity and Diversification of Major Non-Structural Genes vif, vpr, vpu, tat exon 1 and rev exon 1 during Primary HIV-1 Subtype C Infection // PLoS ONE. 2012. Vol. 7 (5). e35491. doi:10.1371/journal.pone.0035491.Lebedev A., Kim K., Ozhmegova E., Antonova A., Kazennova E., Tumanov A., Kuznetsova A. Rev Protein Diversity in HIV-1 Group M Clades // Viruses. 2024. Vol. 16. Р. 759. https://doi.org/10.3390/v16050759.Antonova A.A., Lebedev A.V., Kazennova E.V., Kim K.V., Ozhmegova E.N., Tumanov A.S., Munchak Ya.M., Orlova-Morozova E.A., Pronin A.Yu., Prilipov A.G., Kuznetsova A.I. Variability of VPU protein in HIV-1 sub-subtype A6 in patients with different stages of HIV infection. HIV Infection and Immunosuppressive Disorders, 2024, Vol. 16 (2), рр. 40–50 (In Russ.). http://dx.doi.org/10.22328/2077-9828-2024-16-2-40-50.Rossenkhan R., Novitsky V., Sebunya T.K., Musonda R., Gashe B.A. et al. Viral Diversity and Diversification of Major Non-Structural Genes vif, vpr, vpu, tat exon 1 and rev exon 1 during Primary HIV-1 Subtype C Infection // PLoS ONE. 2012. Vol. 7 (5). e35491. doi:10.1371/journal.pone.0035491.Gondim M.V., da Silva J.X., Prosdocimi F., Leonardecz-Neto E., Franco O.L., Argañaraz E.R. Evidences for viral strain selection in late stages of HIV infection: an analysis of Vpu alleles // Protein J. 2012. Vol. 31 (2). Р. 184–193. doi: 10.1007/s10930-011-9389-y.Антонова А.А., Лебедев А.В., Казеннова Е.В., Ким К.В., Ожмегова Е.Н., Туманов А.С., Мунчак Я.М., Орлова-Морозова Е.А., ПронинА.Ю., Прилипов A.Г., Кузнецова А.И. Вариабельность белка VPU ВИЧ-1 суб-субтипа А6 у пациентов c различными стадиями ВИЧ-инфекции // ВИЧ-инфекция и иммуносупрессии. 2024. Т. 16, № 2. С. 40–50. http://dx.doi.org/10.22328/2077-9828-2024-16-2-40-50.Антонова А.А., Лебедев А.В., Казеннова Е.В., Ким К.В., Ожмегова Е.Н., Туманов А.С., Мунчак Я.М., Орлова-Морозова Е.А., ПронинА.Ю., Прилипов A.Г., Кузнецова А.И. Вариабельность белка VPU ВИЧ-1 суб-субтипа А6 у пациентов c различными стадиями ВИЧ-инфекции // ВИЧ-инфекция и иммуносупрессии. 2024. Т. 16, № 2. С. 40–50. http://dx.doi.org/10.22328/2077-9828-2024-16-2-40-50.Gondim M.V., da Silva J.X., Prosdocimi F., Leonardecz-Neto E., Franco O.L., Argañaraz E.R. Evidences for viral strain selection in late stages of HIV infection: an analysis of Vpu alleles // Protein J. 2012. Vol. 31 (2). Р. 184–193. doi: 10.1007/s10930-011-9389-y.Gondim M.V., da Silva J.X., Prosdocimi F., Leonardecz-Neto E., Franco O.L., Argañaraz E.R. Evidences for viral strain selection in late stages of HIV infection: an analysis of Vpu alleles // Protein J. 2012. Vol. 31 (2). Р. 184–193. doi: 10.1007/s10930-011-9389-y.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.